定量检测体外诊断试剂分析性能评估注册审查指导原则

定义
1. 定量检测体外诊断试剂
  1. 可测量分析物（analyte）的量或浓度并以适当单位的数字量值表达结果的试剂，其产品预期用途一般描述为“本产品用于体外定量检测某样本中的分析物浓度或含量等”。
2. 体外诊断试剂的检测系统
  1. 由样本处理用产品、检测试剂、校准品、质控品、检测设备等构成的，可完成样本从处理到最终结果报告所有阶段的组合。
3. 准确度Accuracy
  1. 正确度Trueness
    1. 指无穷多次重复测量所得量值的平均值与一个参考量值间的一致程度
    2. 有系统测量误差决定，通常用偏倚（bias）表示
  2. 精密度Precision
    1. 是指在规定条件下，对同一或相似被测对象重复测量得到测量示值或测得量值间的一致程度。
    2. 精密度由随机测量误差决定，通常用标准差、方差或变异系数表示
    3. 影响精密度的条件
      1. 操作者
      2. 测量仪器
      3. 测量程序
      4. 试剂批次(lot)
      5. 校准（校准品批次，校准周期）
      6. 运行（run）
      7. 时间
      8. 地点
      9. 环境条件（实验室温度、湿度、空气质量、管理等）
    4. 精密度包括
      1. 重复性
      2. 中间精密度
      3. 再现性
  3. 重复性
    1. 重复性条件下的精密度，包括相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，并且在短时间段内对同一或相似被测对象重复测量
    2. 代表基本不变的测量条件，此条件产生测量结果的变异最小
  4. 再现性/实验室间精密度
    1. 指在包括了不同地点、不同操作者、不同测量系统的测量条件下对同一或相似被测对象重复测量的精密度
    2. 不同测量系统可使用不同测量程序
    3. 再现性条件代表最大改变的测量条件
  5. 中间精密度
    1. 介于重复性和再现性之间的精密度
    2. 指在包括相同的测量程序、相同地点的测量条件下对相同或相似的被测对象在一长时间段内重复测量的精密度
      1. 可包含其他相关条件的改变，例如不同操作者、试剂批号等
    3. 实验室内精密度
      1. 考虑了体外诊断试剂在医学实验室使用过程中的运行、时间等影响因素，
      2. 归类为中间精密度的一种情况
  6. 批间精密度
4. 包容性Inclusivitity
5. 空白限LoB
  1. 指测量空白样本时可能观察到的最高测量结果
6. 检出限LoD
  1. 由给定测量程序得到的测得量值，对于此值，在给定声称物质中存在某成分的误判概率为α时，声称不存在该成分的误判概率为β。对于核酸检测试剂，指持续检出的最低分析物浓度。
7. 定量限LoQ
  1. 指达到预设准确度要求时可测量的最低分析物浓度。
8. 分析特异性Analytical Specificity
  1. 干扰Interference
    1. 是由一个影响量引起的测量的系统效应，该影响量自身不在测量系统中产生信号，但它会引起示值的增加或减少。
  2. 交叉反应Cross-reactivity
    1. 指不是分析物的物质与试剂反应的程度。
9. 高剂量钩状效应High Dose Hook Effect
  1. 是指在免疫化学测量程序中由相对抗体浓度抗原浓度过量或相对抗原浓度抗体浓度过量时的抗原-抗体免疫复合物减少而引起的负偏倚。
  2. 对于部分免疫学原理的产品，检测含有极高浓度的待测抗体/抗原的样本时，饱和反应可能导致检测浓度值低于真实值。
10. 测量区间Measuring Interval
  1. 也称分析测量区间，在该区间内，临床样本在未经稀释、浓缩，或非常规测量程序中步骤的其他前处理情况下，检测结果的线性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范围内。
11. 扩展测量区间
  1. 上限均为测量区间上限╳稀释倍数
  2. 扩展测量区间的下限为测量区间上限
12. 可报告区间
  1. 上限均为测量区间上限╳稀释倍数
  2. 可报告区间下限为检出限
13. 样本类型
14. 回收率
15. 干扰物
  1. 内源性干扰物
  2. 外源性干扰物
16. 线性区间Linearity Interval
  1. 线性
    1. 指给出与样品中被测量的值直接成比例的测得量值的能力。
  2. 线性区间
    1. 在这个区间内，测量结果充分地符合一条合适的直线。
17. 测量程序
  1. 按照一个或多个测量原理和给定的测量方法，基于一种测量模型，对测量所作的详细描述，包括获得测量结果所必需的任何计算
18. 医学决定水平
19. 样本一致性的同源比对研究
目的
1. 指导注册申请人对定量体外诊断试剂进行充分的分析性能评估，并整理形成注册申报资料
2. 为技术审评部门审评注册申报资料提供参考
范围
1. 产品适用性
  1. 定量检测体外诊断试剂
  2. 不适用于定性检测试剂或半定量检测试剂（基于量值检测并通过阈值判断结果的）
2. 不适用说明
  1. 需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
总体要求
1. 检测系统
  1. 完整的
  2. 确定的
2. 试剂要求
  1. 原材料和生产工艺经过选择和确定
  2. 有效质量管理体系下生产
  3. 不接受：研发实验室配置试剂所产生的分析性能评估资料
3. 操作要求
  1. 正确、熟练地
  2. 试剂、方法及样本相关操作
  3. 校准和质控程序
  4. 按试验方案进行操作
4. 适用机型
  1. 一个/多个机型进行建立
    1. 某一项目存在差异，不同机型进行建立
  2. 风险分析进行验证
    1. 机型工作原理
    2. 检测方法
    3. 反应条件控制
    4. 信号处理
5. 包装规格
  1. 多个包装规格应进行差异分析或验证
    1. 如存在性能差异，每个规格均进行
    2. 如不存在性能差异，应详细说明各规格间的差别及可能产生的影响
6. 样本要求
  1. 与预期适用的真是临床样本一致
  2. 允许样本制备
    1. 样本采集
    2. 处理
    3. 运输
    4. 保存
    5. 制备（混合、稀释、标准菌株、标准毒株、临床分离培养物）
具体要求
1. 正确度
  1. 提供评价用物质或比较测量程序的基本信息和选择依据
  2. 三种方法进行正确度评价
    1. 使用参考物质
      1. 推荐的参考物质
      2. 具有互换性的有证参考物质
      3. 公认的参考品、标准品
      4. 参考测量程序赋值的临床样本
      5. 不可采用：
      6. 产品校准品
      7. 申报试剂检测系统定值的质控品
      8. 试验要求
      9. 2~3水平的参考物质
      10. 如只有1水平且无合理稀释方法，说明原因
      11. 包括医学决定水平或参考区间上/下限附近的浓度
      12. 多次重复检测
      13. 平均值与参考值计算偏倚
    2. 方法学比对
      1. 申报试剂与合理的比较测量程序同时检测
      2. 临床样本
      3. 浓度水平覆盖申报试剂的测量区间
      4. 比对研究和偏倚估计
      5. 试验要求
      6. 每个样本重复检测
      7. 平均值/中位数进行回归分析
      8. 评价医学决定水平或参考区间上/下限浓度的偏倚
    3. 回收试验
      1. 适用于可获得标准溶液、标准物质或分析物纯品的试剂
      2. 试验方法
      3. 标准溶液、标准物质或分析物纯品
      4. 加入临床样本中，配置成回回收样品
      5. 至少3个水平的回收样品，测量区间内高、中、低
      6. 包括医学决定水平或参考区间上/下限附近的浓度
      7. 平均值计算回收率
2. 精密度
  1. 根据各测量条件对检测结果影响程度
  2. 设计合理的精密度试验方案
  3. 包括
    1. 重复性
    2. 实验室内精密度
    3. 实验室间精密度
    4. 批间（lot-to-lot）精密度
  4. 样本要求
    1. 临床实际检测样本或其混合物
    2. 测量区间高、中、低在内的3～5个水平
    3. 包括医学决定水平或参考区间上/下限浓度附近的样本
    4. 样本稳定性和一致性
3. 包容性
  1. 病原体检测试剂
    1. 验证申报试剂具有检出不同亚群（组）、血清型或基因型的能力
  2. 部分人类基因检测试剂
    1. 验证申报试剂可检出中国人群已知的常见基因型别和突变位点
4. 空白限、检出限及定量限
  1. 建立
    1. 多个独立的样本（空白样本、低浓度水平样本、已知浓度的低水平样本）
    2. 多天内研究
    3. LoB
      1. 多个独立的空白样本（无分析物）的检测结果计算获得
    4. LoD
      1. 一般由多个独立的低浓度（含有分析物）样本的检测结果，结合LoB进行计算获得
    5. LoQ
      1. 采用对多个已知分析物浓度的样本进行系列稀释后重复检测获得LoD
      2. 对于分析物包括不同型别的检测试剂
      3. 纳入所有代表型别的样本，分别计算各型别的LoD
      4. 取最大值作为申报试剂的LoD
      5. 考虑偏倚和精密度的要求
  2. 验证
    1. 至少2个样本（空白样本、检出限浓度样本、定量限浓度样本）
    2. 多天内进行试验
    3. 每个试剂批次>20个检测结果
    4. 统计比例进行确认
5. 分析特异性
  1. 干扰Interference
    1. 干扰物质
      1. 如基质与样本不同，添加量＜总体积5%
      2. 尽量接近体内循环形式的样品货纯品
      3. 也可使用有代表性的患者样本
      4. 内源性
      5. 血红蛋白
      6. 脂类
      7. 胆红素
      8. 白细胞裂解物
      9. 自身抗体
      10. 异嗜性抗体
      11. 疾病相关蛋白
      12. 患者体内的异常生化代谢物
      13. 外源性
      14. 样本添加剂（抗凝剂或防腐剂）
      15. 常用药物及其代谢物
      16. 患者群体使用的药物及其代谢物
      17. 膳食物质
      18. 样本收集或处理过程中接触到的物质
      19. 样本污染物
    2. 研究方法
      1. 配对比对（添加与未添加比较差异）
      2. 评估干扰物质浓度与干扰程度之间的关系
      3. 明确不产生干扰的物质浓度上限
  2. 交叉反应Cross-reactivity
    1. 交叉反应物质
      1. 分析物的结构类似物
      2. 具有同源性序列的核酸片段
      3. 检测范围外的型别
      4. 易共存的其他类似物
      5. 易引起相同或相似的临床症状的其他病原体
      6. 采样部位正常寄生或易并发的其他微生物（包含近缘微生物）
      7. 已报道对类似试剂或测量程序存在交叉反应的物质
      8. 对异源物质（病原体抗体检测试剂采用基因重组抗原）
    2. 评估交叉反应物质浓度与交叉程度
    3. 明确不产生交叉反应的物质浓度上线
    4. 提供来源、制备、浓度等基本信息
6. 高剂量钩状效应
  1. 多个含有高浓度分析物的样本
  2. 梯度稀释
  3. 由低至高检测
  4. 重复多份进行检测
  5. 确定不产生钩状效应的最高分析物浓度
7. 测量区间及可报告区间
  1. 线性区间
    1. 高值和零浓度/低值样本配置
    2. 一系列不同浓度的样本
    3. 建立阶段
      1. 宽于预期线性区间
      2. 9个左右不同浓度（不包括零浓度）
      3. 根据线性偏差和各浓度重复性，确定检测次数
      4. 均值和预期值进行直线回归分析
      5. 加权最小二乘回归
      6. 提供散点图、线性回归方程、线性相关系数及线性偏差
    4. 验证阶段
      1. 覆盖整个线性区间
      2. 至少5个不同浓度
      3. 每个样本至少2次重复
  2. 测量区间
    1. 测量区间下限为定量限，线性区间包含测量区间
  3. 扩展测量区间和可报告区间
    1. 超出测量区间浓度的样本进行稀释后检测
    2. 上限均为测量区间上限╳稀释倍数
8. 适用的样本类型
  1. 如适用多种样本类型（包括抗凝剂）
    1. 合理评价每种样本类型的适用性
    2. 可比性样本类型，可进行样本一致性的同源比对研究
    3. 不可比样本类型，每种样本类型分别研究
  2. 如样本采集、处理方式存在差异，分析影响并进行针对性的分析性能验证
    1. 不同采集器
    2. 不同样本保存液
    3. 不同核酸提取与纯化
申报资料要求
1. 研究目的
2. 试验方法
  1. 参考总体要求及基本要求
3. 原始数据
4. 数据的统计分析过程及结果
5. 试验地点
6. 试验用试剂、校准品和质控品信息
  1. 名称
  2. 规格
  3. 批号
7. 仪器名称和型号
8. 样本信息
  1. 类型
  2. 来源
  3. 处理方法
  4. 基质类型
  5. 所含物质信息
9. 评估结论
  1. 综合试验结果，合理描述产品分析性能
  2. 输出至说明书
  3. 不同试剂规格
  4. 不同批次
  5. 不同适用机型