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组成要素
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常用酶
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辣根过氧化物酶(HRP)
- 邻苯二胺(OPO)
- 四甲基联苯胺(TMB)
- AEC
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碱性磷酸酶
- 对-硝基苯磷酸盐(PNP)
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β半乳糖甘酶
- 4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖
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酶与抗原抗体结合制备
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标记方法
- 改良过碘酸钠法(HRP标记)
- 戊二醛交联法
- 酶标记结合物纯化
- 酶标记结合物鉴定
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包被(将抗原或抗体结合于固相载体的过程)
- 固相载体:微孔板,磁微粒,膜载体
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包被方法
- 直接法:直接被动吸附固相材料表面
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间接法
- 亲和素-生物素化抗原体或抗原模式
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酶免疫实验分类
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均相酶免疫试验
- 酶放大免疫试验技术
- 克隆酶供体免疫试验
- 异相酶免疫试验
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酶联免疫吸附试验
- 基本原理:包被抗原抗体反应,酶促反应,检测
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方法类型及反应原理
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夹心法
- 双抗体夹心法测抗原
- 双位点一步法检测抗原
- 双抗原夹心法测抗体
- 间接法
- 竞争法(乙肝E抗体HEeAb)
- 捕获法
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应用
- 抗原及其抗体测定
- 蛋白质测定
- 非肽类激素测定
- 药物和毒品测定
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影响因素
- 试剂盒原材料因素
- 标本因素
- 实验环境因素
- 操作因素